用单层分化法进行胚胎干细胞神经分化的研究     

蒙超衡  韦精卫  黄奔  韦力  石德顺 《中国兽医学报》2004,24(5):494-498

用单层分化法研究了 ES细胞从 0～ 316 h(第 14天 )的神经分化过程。无饲养层培养的 ES细胞在无血清的N2 B2 7培养基中开始神经分化。从 72 h开始 ,神经外胚层的特异性转录因子 Sox1表达 ,在克隆的边缘逐渐出现向外迁移的细胞 ,形状呈圆形或椭圆形 ,有 1～ 2个细胞突起。在 191h(第 8天 )之后 ,细胞可迁移至克隆边缘的 2 0 0 μm之外 ,这些有细长突起的细胞表达神经元特异性蛋白 Tau。以后 ,迁移细胞的突起开始交叠成网状。 316 h(第 14天 )时 ,细长的纤维可跨越在不同的克隆之间 ,长达上千微米。此时 ,免疫染色的结果表明 ,在克隆的中央有较多的圆形 Nestin阳性细胞 ,而克隆的边缘有大量的 β- tubulin 阳性细胞 ,它们交织成复杂的网状图像。阶段性表达基因的表达时序研究表明 ,ES细胞的特异性转录因子 Oct4开始减弱时 ,Sox1表达开始 ,此时细胞由全能状态进入早期神经分化状态 ;Tau的表达是 Sox1表达的下游事件。这一时序与胚胎发育中神经发生的时序相符。单层分化法能直观地展示 ES细胞的神经分化过程 ,可作为研究细胞分化、胚胎发育及药物筛选的体外模型  相似文献   

胚胎干细胞及种系嵌合体的研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

王娟  杜立新 《动物医学进展》2003,24(4):15-18

胚胎干细胞是着床前的囊胚内细胞团或早期胎儿的原始生殖细胞经体外分化抑制培养建立的多能性细胞系 ,具有与胚胎细胞相似的形态特征和分化潜能 ,体外培养时保持未分化状态 ,可以传代增殖。改变维持胚胎干细胞不分化的培养条件 ,胚胎干细胞可自发分化成多细胞结构。在一定诱导下 ,胚胎干细胞可向多个方向分化 ,并生成多种功能细胞。胚胎干细胞注入到胚泡期胚胎或与桑椹期胚胎聚合 ,可以参与包括性腺在内的各种组织的嵌合体的形成。胚胎干细胞在细胞分化与调控 ,胚胎发育 ,遗传病 ,肿瘤 ,免疫和组织或器官移植等研究中显示着广泛的应用前景。而种系嵌合体的获得是实现 ES细胞途径的决定步骤 ,低的种系嵌合率则是制约 ES细胞应用的关键。提高供体 PGCs在受体生殖腺中的比例 ,缩短 ES细胞的体外培养时间 ,以及注入早期发育阶段的受体胚胎等都能提高种系嵌合率。文章从多个方面综述了胚胎干细胞的最新研究成果 ,并着重以禽类 ES细胞为例论述了种系嵌合体的检测方法 ,种系嵌合率的影响因素以及提高种系嵌合率的方法  相似文献   

哺乳动物附植前胚胎的基因表达调控   总被引：4，自引：0，他引：4  

姚宁  曾申明 《中国畜牧杂志》2006,42(1):64-67

哺乳动物胚胎附植前期包括:合子的形成,胚胎基因组的激活和细胞分化的开始。在这个时期,发育由母源物质控制转为合子基因控制,在此过程,同时形成染色质介导的转录抑制时期,要解除抑制必须经过胚胎基因组的激活。通过对体内、外附植前胚胎的mRNA的表达特点以及它们与成功发育联系的研究,可以筛选出最佳的体外培养条件,设计最佳的核移植方案。  相似文献   

猪胚胎死亡的影响因素及其预防措施     

李明丽  鲁绍雄 《家畜生态》2004,25(4):241-244

猪胚胎死亡直接影响着母猪的产仔数，并进而影响着养猪生产的经济效益。因此，在深入研究猪胚胎死亡规律及其影响因素的基础上，通过有效的措施降低胚胎死亡率，对提高母猪窝产仔数和经济效益具有十分重要的意义。本文综述了影响猪胚胎死亡的遗传、环境、营养和疾病等因素，并对生产实践中如何通过综合预防措施降低猪胚胎死亡率进行了初步探讨。  相似文献   

高海拔地区鸡胚发育关键因素研究     

张浩  吴常信  强巴央宗  唐晓惠 《中国家禽》2005,27(8):8-10

对藏鸡(T)、饲养在北京的藏鸡(TB)、矮小隐性白(D)、农大小型蛋鸡商品代种蛋(M)、寿光鸡(S)、藏鸡×矮小隐性白(TD)、藏鸡×寿光鸡(TS)7组种蛋在西藏林芝进行孵化研究,通过阶段死亡率、出雏率、失水率数据分析了影响高海拔地区胚胎发育的关键因素。结果表明胚胎本身的高原生活力是鸡蛋高海拔孵化主要因素,其次是蛋壳传导力。  相似文献   

Identification and characterisation of microRNAs and Piwi-interacting RNAs in cockerels’ spermatozoa by Solexa sequencing     

S. Wu  J. Guo  L. Zhu  J. Yang  S. Chen 《British poultry science》2018,59(4):371-380

1. There has been substantial research focused on the roles of microRNAs (miRNAs) and Piwi-interacting RNAs (piRNAs) derived from mammalian spermatozoa; however, comparatively little is known about the role of spermatozoa-derived miRNAs and piRNAs within breeding cockerels’ spermatozoa.

2. A small RNA library of cockerels’ spermatozoa was constructed using Illumina high-throughput sequencing technology. Unique sequences with lengths of 18–26 nucleotides were mapped to miRBase 21.0 and unique sequences with lengths of 25–37 nucleotides were mapped to a piRNA database. A total of 1311 miRNAs and 2448 potential piRNAs were identified. Based on stem-loop qRT-PCR, 8 miRNAs were validated.

3. Potential target genes of the abundant miRNAs were predicted, and further Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes database (KEGG) and Gene Ontology (GO) analyses were performed, which revealed that some candidate miRNAs were involved in the spermatogenesis process, spermatozoa epigenetic programming and further embryonic development.

5. GO and KEGG analyses based on mapping genes of expressed piRNAs were performed, which revealed that spermatozoal piRNAs could play important regulatory roles in embryonic development of offspring.

6. The search for endogenous spermatozoa miRNAs and piRNAs will contribute to a preliminary database for functional and molecular mechanistic studies in embryonic development and spermatozoa epigenetic programming.  相似文献   

Melatonin reduces apoptotic cells,SOD2 and HSPB1 and improves the in vitro production and quality of bovine blastocysts          下载免费PDF全文

TC Marques  EC da Silva Santos  TO Diesel  LO Leme  CF Martins  MAN Dode  BG Alves  FPH Costa  EB de Oliveira  ML Gambarini 《Reproduction in domestic animals》2018,53(1):226-236

Effects of adding different concentrations of melatonin (10^?7, 10^?9 and 10^?11 M) to maturation (Experiment 1; Control, IVM  + 10^?7, IVM  + 10^?9, IVM  + 10^?11) and culture media (Experiment 2; Control, IVC  + 10^?7, IVC  + 10^?9, IVC  + 10^?11) were evaluated on in vitro bovine embryonic development. The optimal concentration of melatonin (10^?9 M) from Experiments 1–2 was tested in both maturation and/or culture media of Experiment 3 (Control, IVM  + 10^?9, IVC  + 10^?9, IVM /IVC  + 10^?9). In Experiment 1, maturated oocytes from Control and IVM  + 10^?9 treatments showed increased glutathione content, mitochondrial membrane potential and percentage of Grade I blastocysts (40.6% and 43%, respectively). In Experiment 2, an increase in the percentage of Grade I blastocysts was detected in IVC  + 10^?7 (43.5%; 56.7%) and IVC  + 10^?9 (47.4%; 57.4%). Moreover, a lower number and percentage of apoptotic cells in blastocysts were observed in the IVC  + 10^?9 group compared to Control (3.8 ± 0.6; 3.6% versus 6.1 ± 0.6; 5.3%). In Experiment 3, the IVC  + 10^?9 treatment increased percentage of Grade I blastocysts with a lower number of apoptotic cells compared to IVM /IVC  + 10^?9 group (52.6%; 3.0 ± 0.5 versus 46.0%; 5.4 ± 1.0). The IVC  + 10^?9 treatment also had a higher mRNA expression of antioxidant gene (SOD 2) compared to the Control, as well as the heat shock protein (HSPB 1) compared to the IVM  + 10^?9. Reactive oxygen species production was greater in the IVM /IVC  + 10^?9 treatment group. In conclusion, the 10^?9 M concentration of melatonin and the in vitro production phase in which it is used directly affected embryonic development and quality.  相似文献   

高浓度葡萄糖对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响     

张童桐  司莉南  许红霞  程文秀  陶瑞鑫  李娟 《畜牧与兽医》2021,(4):10-16

试验旨在探究高浓度葡萄糖对猪卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育能力的影响。取体外分离处于生发泡期的猪卵丘卵母细胞复合体(COCs),分为3个处理组。分别用含葡萄糖浓度为5.6 mmol/L(C组)、10 mmol/L(G-1组)、15 mmol/L(G-2组)的培养液,进行体外成熟(IVM)处理,42 h后观察,并统计卵丘细胞扩散情况和第一极体排出率;对体外成熟42 h后的卵母细胞孤雌激活,统计2-细胞、4-细胞和第7天囊胚发育。结果发现,G-1组和G-2组卵丘细胞扩散度显著低于C组(P<0.05);G-1组和G-2组的MII期卵母细胞死亡率和存活率与C组相比无显著差异(P>0.05),但G-1组极体率显著降低(P<0.05),G-2组极体率极显著低于C组(P<0.01)。孤雌激活后,与C组相比,G-1组和G-2组的2-细胞分裂率显著降低(P<0.05),4-细胞分裂率以及囊胚发育率均极显著降低(P<0.01),但G-1、G-2组囊胚细胞数量与C组相比无显著性差异(P>0.05)。进一步线粒体染色发现,G-1组和G-2组的线粒体与C组相比分布不均。与C组相比,荧光结果显示G-1组和G-2组不仅活性氧(ROS)水平极显著升高(P<0.01),而且G-1组与G-2组谷胱甘肽(GSH)含量显著降低(P<0.05),虽然G-1组丙二醛(MDA)无显著性差异(P>0.05),但G-2组丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05)。研究结果表明,葡萄糖浓度高会影响猪卵母细胞线粒体分布,氧化应激水平升高,成熟效率降低,损害早期胚胎的发育潜能。  相似文献   

胚胎干细胞向神经细胞定向诱导分化方法的研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

薛亚梅  王锋 《中国畜牧杂志》2005,41(8):58-61

胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能,有望成为治疗神经系统疾病重要的种子细胞来源。如何高效地诱导胚胎干细胞向特定神经细胞分化是目前研究的热点。本文就胚胎干细胞定向分化成神经细胞的3种方法:RA诱导法、谱系选择法和SDIA法及其移植研究做一综述。  相似文献   

氧气对低地鸡蛋胚胎死亡和孵化率的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

张浩  吴常信  强巴央宗  魏泽辉  唐晓惠  李俊英  凌遥 《畜牧兽医学报》2006,37(2):112-116

通过模拟常压低氧和高海拔增氧孵化试验，研究了氧气浓度对低地良种鸡蛋胚胎死亡率和孵化率的影响。死亡胚胎的分布用2阶段增长模型分析。模拟2900m海拔常压低氧孵化增加了胚胎后期死亡率，使孵化率降低到接近2900m海拔实际孵化率水平；2900m海拔全期增氧孵化可以有效降低前期和后期胚胎死亡率，大大提高孵化率；阶段增氧孵化也能不同程度提高孵化率，改变胚胎死亡分布，其中效果最好的为前期增氧组。结果说明低氧是影响2900m海拔鸡蛋孵化的最主要因素。  相似文献